短鏈脂肪酸(Short-Chain Fatty Acids，SCFAs)是以碳原子數(shù)目小于6的有機(jī)脂肪酸為主，又稱揮發(fā)性脂肪酸(volatile fatty acids，VFA)，是腸道內(nèi)未消化的復(fù)合碳水化合物被結(jié)腸厭氧微生物發(fā)酵的主要代謝終產(chǎn)物。主要包括乙酸、丙酸、異丁酸、丁酸、異戊酸、戊酸和己酸等。

　　測(cè)定SCFAs 的含量是反映腸道菌群狀況以及診斷和治療某些疾病的重要生理指標(biāo)。目前用于分析SCFAs的生物樣品主要有糞便、腸道及腸道內(nèi)容物、尿液、血清/血漿、乳液、唾液等。樣品前處理是分析SCFAs關(guān)鍵步驟，不同類型生物樣品的前處理手段有所不同：對(duì)于基質(zhì)復(fù)雜的生物樣品，一般需要先去除蛋白免受基質(zhì)干擾，然后采用蒸餾法、超濾法、高速離心法、萃取法、衍生化等方法進(jìn)一步純化;對(duì)于雜質(zhì)較少的液體類樣品可稀釋后進(jìn)行純化處理或稀釋后直接檢測(cè)。在諸多純化方法中，由于蒸汽污染、分離不完全或定量不準(zhǔn)確等原因，蒸餾法、超濾法等方法逐漸被其他方法代替，高速離心法多與其他提取方法聯(lián)用以輔助樣品分離。

　　含SCFAs的生物樣品基質(zhì)多較為復(fù)雜，容易對(duì)測(cè)定產(chǎn)生干擾，甚至影響儀器性能，因此去除蛋白對(duì)于分析SCFAs尤為重要。去除蛋白的方法有酸沉淀法、有機(jī)溶劑沉淀法、鹽析法等。高氯酸、硫酸、鹽酸等是常用的酸性沉淀劑，但強(qiáng)酸性會(huì)降低樣品pH和稀釋樣品，降低檢測(cè)靈敏度甚至造成儀器損傷。利用甲醇、乙腈、異丙醇等有機(jī)溶劑可以克服酸沉淀法的缺點(diǎn)，有利于SCFAs萃取。鹽析法是在樣品溶液中加入無(wú)機(jī)鹽以改變揮發(fā)性組分的分配系數(shù)，使SCFAs與基質(zhì)分離。

　　針對(duì)SCFAs的檢測(cè)技術(shù)較多，且各有特色和優(yōu)勢(shì)。以最常見的短鏈脂肪酸幾種檢測(cè)方法為例，常規(guī)的檢測(cè)方法如氣相色譜法、氣相色譜質(zhì)譜聯(lián)用、液相色譜法、 離子排阻色譜法等，傅里葉紅外光譜、核磁共振等。

　　目前我們最常用的氣相色譜串聯(lián)質(zhì)譜法。氣相色譜串聯(lián)質(zhì)譜法是在氣相色譜基礎(chǔ)上，樣品中各組分經(jīng)氣相色譜分離后，質(zhì)譜作為其檢測(cè)器，先將被測(cè)物質(zhì)離子化，根據(jù)離子的質(zhì)荷比進(jìn)行分離。質(zhì)譜法較單純色譜法相比不光能定量，還能更準(zhǔn)確地對(duì)短鏈脂肪酸進(jìn)行定性，并有效減少干擾峰，且靈敏度也大大提升，同時(shí)氣質(zhì)儀器還有用相應(yīng)的質(zhì)譜譜庫(kù)。氣相色譜串聯(lián)質(zhì)譜儀較氣相色譜在靈敏度上有所提升，而且有譜庫(kù)可以比對(duì)，沒有標(biāo)準(zhǔn)品情況下也能對(duì)樣品中短鏈脂肪酸進(jìn)行定性，分析時(shí)間上同氣相基本一樣。

　　短鏈脂肪酸是維持動(dòng)物腸道平衡的重要代謝產(chǎn)物，在動(dòng)物體內(nèi)能參與不同器官的代謝，因此其檢測(cè)方法尤為重要。目前針對(duì)檢測(cè)SCFAs的生物樣品，利用較多的是糞便，對(duì)其他生物樣品如血漿、尿液、乳液中SCFAs的研究還相對(duì)匱乏。樣品前處理方法較多，但各有利弊，缺乏通用、簡(jiǎn)捷、標(biāo)準(zhǔn)化的預(yù)處理方法。

　　儀器方面主要應(yīng)用色譜及色譜質(zhì)譜聯(lián)用技術(shù)，各項(xiàng)檢測(cè)技術(shù)各有利弊，根據(jù)樣品濃度高低的要求，以及實(shí)驗(yàn)室自身儀器裝備來(lái)選擇不同的檢測(cè)技術(shù)。未來(lái)短鏈脂肪酸檢測(cè)方法的開發(fā)中，應(yīng)結(jié)合現(xiàn)在高分辨質(zhì)譜的優(yōu)勢(shì)，目前高分辨質(zhì)譜技術(shù)崛起，具有高分辨率、高靈敏度和高準(zhǔn)確度的儀器為未來(lái)檢測(cè)帶來(lái)無(wú)限可能。