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科米代謝 液相色譜檢測(cè)器介紹

  液相色譜檢測(cè)器一般常用的有固定波長(zhǎng)紫外檢測(cè)器、可調(diào)波長(zhǎng)紫外/可見(jiàn)檢測(cè)器、可編程紫外/可見(jiàn)檢測(cè)器、光電二極管矩陣檢測(cè)器、示差折光檢測(cè)器、熒光檢測(cè)器、電化學(xué)檢測(cè)器、電導(dǎo)檢測(cè)器,其他的還有放射性檢測(cè)器、質(zhì)譜檢測(cè)器、熱能檢測(cè)器、LALLS檢測(cè)器、蒸發(fā)質(zhì)量檢測(cè)器、粘度檢測(cè)器等。

  具體如下:

  一、紫外/可見(jiàn)檢測(cè)器

  紫外-可見(jiàn)光檢測(cè)器是應(yīng)用最廣泛的檢測(cè)器,遵循的原理是Beer’s Law - BEER定律,即光能量P0 = 透過(guò)溶劑的光能量, P = 透過(guò)樣品的光能量,光通量(透過(guò)率%) T=P/P0,吸光度 A = -log(T)= log(P0/P),吸光度 = 單位吸光度 ,即 A = abc,也就是說(shuō)樣品池(S)中的樣品對(duì)光產(chǎn)生吸收有信號(hào)差,如是可變波長(zhǎng)檢測(cè)器還有分光系統(tǒng)(光柵) 同紫外檢測(cè)器靈敏度有關(guān)的因素有信號(hào)強(qiáng)度(S) 和噪音(N)。

  從BEER定律可看出信號(hào)強(qiáng)度(S)與樣品的種類、樣品濃度及進(jìn)樣的體積、檢測(cè)池的長(zhǎng)度、所使用的波長(zhǎng)、檢測(cè)器的時(shí)間常數(shù)有關(guān)。

  噪音(N)與流動(dòng)相、 所使用的波長(zhǎng)燈的能量、檢測(cè)器的時(shí)間常數(shù)以及非檢測(cè)器因素如電噪音、泵脈動(dòng)等有關(guān)。

  紫外檢測(cè)器的靈敏度與溶劑的影響、背景吸收、示差折光效應(yīng)有關(guān),不同種類溶劑有其截止波長(zhǎng),溶劑的質(zhì)量好壞對(duì)其截止波長(zhǎng)有影響,溶劑質(zhì)量與含紫外吸收的雜質(zhì)、溶解在其中的氧氣、緩沖液溶質(zhì)的紫外吸收等因素有關(guān);背景吸收減少線性范圍、許多溶劑會(huì)產(chǎn)生背景吸收,所以應(yīng)該選擇應(yīng)用;示差折光效應(yīng)會(huì)產(chǎn)生假的紫外吸收變化,定量誤差導(dǎo)致光譜圖不準(zhǔn)確,梯度應(yīng)用時(shí)有嚴(yán)重的基線漂移。

 

  二、光電二極管矩陣檢測(cè)器(Photodiode Array Detector)

  光電二極管矩陣檢測(cè)器簡(jiǎn)稱PDA,它可以兼顧紫外檢測(cè)器及可見(jiàn)分光光度計(jì)的信息,在收集色譜圖的同時(shí)得到光譜圖,自動(dòng)完成色譜峰的純度鑒定以及色譜峰的確認(rèn),可以對(duì)任意波長(zhǎng)進(jìn)行再處理,可以從硬件上消除示差折光效應(yīng),一般考察PDA的指標(biāo)是色譜的靈敏度、光譜的靈敏度以及光譜的分辨率。

 

  三、示差折光檢測(cè)器

  示差折光檢測(cè)器是目前液相色譜中常用的一種檢測(cè)器,它可與輸液泵,色譜柱,進(jìn)樣器等組成凝膠滲透色譜儀或高速液相色譜儀系統(tǒng),也可以配置適當(dāng)?shù)倪M(jìn)樣系統(tǒng)作為單獨(dú)的分析儀器使用。對(duì)所有溶質(zhì)都有響應(yīng),某些不能用選擇性檢測(cè)器檢測(cè)的組分,如高分子化合物、糖類、脂肪烷烴等,可用示差檢測(cè)器檢測(cè)。由于不同的液體折光不同,因此本檢測(cè)器通用性強(qiáng),可廣泛地應(yīng)用于化工、石油、醫(yī)藥、食品等領(lǐng)域。

  示差折光檢測(cè)器是基于連續(xù)測(cè)定樣品流路和參比流路之間折射率的變化來(lái)測(cè)定樣品含量的。光從一種介質(zhì)進(jìn)入另一種介質(zhì)時(shí),由于兩種物質(zhì)的折射率不同就會(huì)產(chǎn)生折射。只要樣品組分與流動(dòng)相的折光指數(shù)不同,就可被檢測(cè),二者相差愈大,靈敏度愈高,在一定濃度范圍內(nèi)檢測(cè)器的輸出與溶質(zhì)濃度成正比。

  缺點(diǎn)是不能做梯度實(shí)驗(yàn),最大的池耐壓是 100 psi,流速范圍是 0.3-10 ml/min。

科米代謝 液相色譜檢測(cè)器介紹

  四、熒光檢測(cè)器(Fluorescence Detector)

  熒光檢測(cè)器是高壓液相色譜儀常用的一種檢測(cè)器。用紫外線照射色譜餾分,當(dāng)試樣組分具有熒光性能時(shí),即可檢出。其特點(diǎn)是選擇性高,只對(duì)熒光物質(zhì)有響應(yīng);靈敏度也高,最低檢出限可達(dá)10-12g/ml,適合于多環(huán)芳烴及各種熒光物質(zhì)的痕量分析。也可用于檢測(cè)不發(fā)熒光但經(jīng)化學(xué)反應(yīng)后可發(fā)熒光的物質(zhì)。如在酚類分析中,多數(shù)酚類不發(fā)熒光,為此先經(jīng)處理使其變?yōu)闊晒馕镔|(zhì),而后進(jìn)行分析。

  熒光檢測(cè)器濾光片可以分為近通( Short pass) -低于特定點(diǎn)的所有波長(zhǎng)可以通過(guò),遠(yuǎn)通 (Long pass )- 高于特定點(diǎn)的所有波長(zhǎng)可以通過(guò),帶通( Band pass )- 在特定范圍內(nèi)的所有波長(zhǎng)可以通過(guò)。

 

  五、電化學(xué)檢測(cè)器 (Electrochemical Detector)

  電化學(xué)檢測(cè)器的原理是隨著化合物被氧化或還原能產(chǎn)生正比于待測(cè)化合物濃度的電流,一般在特殊情況下使用,主要用來(lái)測(cè)定化學(xué)性質(zhì)不穩(wěn)定的離子,如容易被氧化或還原的離子。

  該檢測(cè)器的特性是選擇性非常高,只有容易氧化或還原的電活性物質(zhì)才可被檢測(cè)。例如,即便有高含量的氯化物、硫酸鹽共存時(shí),其他離子的檢測(cè)也不受干擾,因?yàn)檫@兩種離子不被電化學(xué)檢測(cè)器所檢測(cè)。

科米代謝 液相色譜檢測(cè)器介紹

  六、電導(dǎo)檢測(cè)器( Conductivity Detector)

  所有的離子化合物以及可被解離的化合物的水溶液能夠?qū)щ姡妼?dǎo)檢測(cè)器就是以液相色譜流動(dòng)相的導(dǎo)電度的變化作為定量依據(jù)的,流動(dòng)相攜帶樣品通過(guò)流通池,空白流動(dòng)相會(huì)產(chǎn)生一個(gè)電導(dǎo)值,流動(dòng)相加樣品的電導(dǎo)減去流動(dòng)相的電導(dǎo)即為樣品產(chǎn)生的電導(dǎo)值,該值與待測(cè)樣品濃度成正比。

  電導(dǎo)檢測(cè)器以導(dǎo)電溶液作為介質(zhì),所以用緩沖溶液作為流動(dòng)相是合適的,但是不可避免的會(huì)大大提高檢測(cè)器的背景基流,因此在無(wú)抑制柱的離子色譜中多數(shù)使用濃度很小的有機(jī)酸或有機(jī)酸鹽作為流動(dòng)相,以減低背景基流。

  該檢測(cè)器的特性是結(jié)構(gòu)比較簡(jiǎn)單,靈敏度比較低,對(duì)于離子的檢測(cè)有獨(dú)特的作用??傊鞣N檢測(cè)器有其不同的特點(diǎn),適用的范圍也不同,我們應(yīng)該根據(jù)不同的使用環(huán)境合理選擇檢測(cè)器,更好的提高工作效率。

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