總糖包括還原糖和非還原糖,還原糖是活性糖類物質,可以通過直接化學滴定法進行定量檢測,如葡萄糖、麥芽糖等。非還原糖是無活性的糖類物質,可以通過水解等方式生成還原糖,如蔗糖、淀粉等。因此,總糖的測定一般通過水解的方式將食品中的糖類物質完全水解成為還原糖后進行定量檢測??偺桥c還原糖檢測方法主要有滴定法、分光光度法、高效液相色譜法、氣相色譜法、旋光法、酶標儀法等。
滴定法是總糖與還原糖較為常用的測定方法之一,主要有直接滴定法、高錳酸鉀滴定法、鐵氰化鉀滴定法等。其中直接滴定法是其中最為常用的方法,需要試劑用量少,檢測成本低,操作簡便;但要嚴格控制檢測條件,即控制加熱強度要在2min內達穩(wěn)定沸騰,減少氧氣對滴定終點判斷的影響等。直接滴定法主要是通過將待測試樣滴定到已標定的臨用時混合的斐林試劑甲液、乙液或堿性酒石酸銅甲液、乙液中,亞甲基藍為指示劑,由消耗試液體積數計算總糖與還原糖的含量,直接滴定法廣泛應用總糖與還原糖的檢測中。
分光光度法的原理是將糖類物質水解成還原糖,通過還原糖與顯色劑反應生成可在紫外、可見光范圍內有吸收峰的物質,通過測定標準物質吸光值與濃度的標準曲線方程,再將試液的吸光值代入曲線方程即可測定還原糖的含量。常用顯色劑有:3-5-二硝基水楊酸、蒽酮-硫酸等。其操作簡單易行、結果準確度高,重復性好、檢測成本低等優(yōu)點,被廣泛應用于各類樣品中總糖與還原糖的測定。
高效液相色譜法是根據不同分子結構和相對分子質量的糖類物質與色譜柱填充物的作用力程度的差異,洗脫保留時間不同而將各糖類物質進行分離,并通過特定檢測器分別進行定量檢測,常用的檢測器有示差折光檢測器、蒸發(fā)光散射檢測器、質譜等。高效液相色譜能夠一次分別準確測定各糖類物質的含量,如葡萄糖、果糖、木糖、麥芽糖、蔗糖、乳糖等糖類物質的含量同時測定,具有分離效率高、檢測速度快、靈敏度高、結果準確可靠等優(yōu)點。高效液相色譜法作為實驗室中高端的大型儀器設備,為大批量樣品檢測和多種糖類物質的同時檢測,結供便捷高效的方法。
隨著檢測技術的成熟,糖類物質的檢測方法得到推廣,使實驗人員運用起來更方便得心應手??泼状x也為您檢測提供優(yōu)質的服務。