衍生化是一種利用化學(xué)變換把化合物轉(zhuǎn)化成類似化學(xué)結(jié)構(gòu)的物質(zhì)。一般來說，一個特定功能的化合物參與衍生反應(yīng)，溶解度，沸點(diǎn)，熔點(diǎn)，聚集態(tài)或化學(xué)成分會產(chǎn)生偏離。由此產(chǎn)生的新的化學(xué)性質(zhì)可用于量化或分離。樣品的衍生化的作用主要是把難于分析的物質(zhì)轉(zhuǎn)化為與其化學(xué)結(jié)構(gòu)相似但易于分析的物質(zhì)，便于量化和分離。
在液相色譜法中，紫外吸收檢測器是最常見的一種選擇性、高靈敏度檢測器。但很多化合物在紫外可見光譜區(qū)無吸收，無法檢測。將它們與帶有紫外吸收基團(tuán)的衍生試劑在一定條件下發(fā)生反應(yīng)，由于反應(yīng)產(chǎn)物帶有發(fā)色基團(tuán)而能被檢測。
常用柱前衍生試劑一般需具備以下幾個特點(diǎn)：
(1)摩爾吸光系數(shù)大;
(2)良好發(fā)光或發(fā)色性能，與被標(biāo)示生物基質(zhì)結(jié)合后特性不減弱;
(3)可與被標(biāo)示物通過物理或化學(xué)作用結(jié)合，未結(jié)合標(biāo)示劑及其水解產(chǎn)物易于清除或分離;
(4)與背景對比明顯，以避開雜質(zhì)干擾，提高檢測靈敏度;
(5)標(biāo)記反應(yīng)條件溫和，確保被標(biāo)示生物基質(zhì)原有化學(xué)性質(zhì)不被破壞;
(6)易于合成、保存，無毒;
(7)形成衍生物在乙睛和甲醇中有足夠溶解度;
(8)衍生產(chǎn)物穩(wěn)定性強(qiáng)。
幾種常見的衍生反應(yīng)
1.硅烷化試劑
硅烷基指三甲基硅烷Si(CH3)3或稱TMS。硅烷化作用是指將硅烷基引入到分了中，一般是取代活性氫。活性氫被硅烷基取代后降低了化合物的極性，減少了氫鍵束縛。因此所形成的硅烷化衍生物更容易揮發(fā)。同時，由于含活性氫的反應(yīng)位點(diǎn)數(shù)目減少，化合物的穩(wěn)定性也得以加強(qiáng)。硅烷化化合物極性減弱，被測能力增強(qiáng)，熱穩(wěn)定性提高。
硅烷化在GC分析中用途最大。許多被認(rèn)為是不揮發(fā)性的或是在200～300℃熱不穩(wěn)定的羥基化合物經(jīng)過硅烷化后成功的進(jìn)行色譜分析。
硅烷化試劑作用同時受到溶劑系統(tǒng)和添加的催化劑的影響。催化劑的使用(如三甲基氯硅烷，吡啶)可加快硅烷化試劑的反應(yīng)。確定好硅烷化反應(yīng)的時間和溫度至關(guān)重要。必須知道衍生化的轉(zhuǎn)化速率，以實(shí)現(xiàn)對未知樣品的定最分析。硅烷化試劑一般都對潮氣敏感，應(yīng)密封保存以防止其吸潮失效。這些硅烷化試劑適用于范圍較廣，但如果使用過最，則可能給火焰離子化檢測器造成些麻煩。
三甲基硅烷是GC分析最常用的通用硅烷化基團(tuán)。引入此基團(tuán)可改善色譜分離，并使得特殊檢測技術(shù)的應(yīng)用成為可能。
硅烷化試劑還可以用于對玻璃器具(如GC的內(nèi)襯管)和色譜的擔(dān)體進(jìn)行去活化。
硅烷化試劑主要是(氯)甲基硅烷系列。
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酰化作用作為硅烷化的代替方法，可通過羧酸或共衍生物的作用將含有活潑氫合物(如-OH、-SH、-NH)轉(zhuǎn)化為酯、硫酯或酰胺。含有鹵離了的羰基基團(tuán)可增強(qiáng)電了捕獲檢測器酞化作用具有很多優(yōu)點(diǎn)：保護(hù)不穩(wěn)定基團(tuán)，從而增加了化合物的穩(wěn)定性;可提高如糖類，氨基酸等物質(zhì)的揮發(fā)性。這些物質(zhì)常帶有大量的極性官能團(tuán)，加熱時易分解;有助于混合物的分離;使用ECD檢測，分析物檢測下限可降低很多。常用的酰基化試劑有：乙酸酐、三氟乙酸酐、五氟丙酸酐、七氟丁酸酐、N-甲基二(三氟乙酰胺)、1-(三氟乙?；?咪唑等。
3.烷基化試劑
烷基化作用是將烷基官能團(tuán)(脂肪族或脂肪，芳香族)添加到活性官能團(tuán)(H)上。以烷基基團(tuán)代替氫的重要性在于生成的衍生物與原來化合物相比極勝大為下降。該試劑常用于修飾改良含有酸性氫的化合物如羧酸和苯酚。
生成的產(chǎn)物有醚，酯，硫醚，硫酯，正烷基胺和正烷基酰胺。弱酸性官能團(tuán)(如醇)的烷基化要求有強(qiáng)堿催化劑(氫氧化鈉，氫氧化鉀)。酸性稍強(qiáng)的OH基團(tuán)如苯酚和羧酸，弱堿催化劑(氯化氫，三氟化硼)即可。常用的烷基化試劑有重氮甲烷等。
