1.什么是殘留和污染?

　　殘留(carry-over)是由于前一個(gè)樣品中被測物少量駐留于系統(tǒng)中并被引入到下一個(gè)進(jìn)樣的樣品中，或者是由被測物在進(jìn)樣系統(tǒng)中吸附而造成的現(xiàn)象。

　　殘留主要可以分為三種：

　?、?首先是傳統(tǒng)意義上的殘留主要來自系統(tǒng)中，主要是由于系統(tǒng)中的死體積所產(chǎn)生。

　　② 由于吸附(實(shí)驗(yàn)耗材，管路)導(dǎo)致的殘留。

　?、?在色譜中不完全的洗脫形成的殘留。

　　污染是由于樣品的接收，處理和分析的實(shí)驗(yàn)操作過程中所引入任何能產(chǎn)生檢測干擾的現(xiàn)象。任何形式的殘留都可以視為污染，所以相對于殘留，污染具有更多的隨機(jī)性和多源性，這也使得它更難以被診斷和糾正。

　　污染可分為三大類：

　?、?樣品在儲(chǔ)存中和樣本制備前被分析物污染，這與從人/動(dòng)物取樣轉(zhuǎn)移到樣品管和保存的過程相關(guān)。

　?、?樣品在準(zhǔn)備過程中被分析物污染，這表現(xiàn)為樣品從樣品前處理到進(jìn)LC-MS分析的過程有關(guān)。

　　③ 由表現(xiàn)像待測物的未知化合物造成，這主要體現(xiàn)為由基質(zhì)效應(yīng)引起的離子化抑制或增強(qiáng)的表現(xiàn)。

　　由于殘留和污染都會(huì)影響方法的精密度和準(zhǔn)確度，因此必須被仔細(xì)監(jiān)測和控制。

　　2.殘留和污染對實(shí)驗(yàn)結(jié)果的評(píng)估

　　根據(jù)FDA的生物分析指導(dǎo)原則，如果殘留空白中分析物峰面積大于LLOQ峰面積的20.0%或觀察到的內(nèi)標(biāo)的峰面積不應(yīng)大于同一分析批中校準(zhǔn)樣品、質(zhì)量控制樣品和其他樣品中觀察到的內(nèi)標(biāo)峰面積平均值的5.0%，那么殘留可能會(huì)影響到分析的結(jié)果，需要進(jìn)行殘留評(píng)估。

　　當(dāng)樣品的殘留影響百分比(ECI%)小于5%時(shí)，可以認(rèn)為該樣品不受影響，相反則需要對該樣品進(jìn)行重分析或重進(jìn)樣。

　　3.殘留和污染的控制和消除

　　殘留可以通過在高濃度的標(biāo)準(zhǔn)或QC樣品之后的空白基質(zhì)的分析來評(píng)估，另外，可以在分析批的起始空位分析數(shù)個(gè)基質(zhì)空白樣品來確認(rèn)儀器系統(tǒng)干凈無污染。

　　一般來說對于有化合物殘留的樣品分析實(shí)驗(yàn)項(xiàng)目可以通過更換產(chǎn)生殘留的試劑，色譜柱等方式來消除，但很多時(shí)候不可能消除殘留，所以需要通過合理的安排樣品順序：如參考血藥代謝曲線濃度，將低濃度樣品安排在前，高濃度樣品靠后的方式，或在高濃度樣品后增加空白樣品來減少殘留。

　　污染的存在也可以通過監(jiān)測基質(zhì)空白，試劑空白和溶劑空白中化合物和內(nèi)標(biāo)的存在來判斷，另外，在實(shí)際的實(shí)驗(yàn)中，我們也常用進(jìn)空氣針的方法來判斷污染和殘留是來自進(jìn)樣板還是來自儀器管路中，通過選擇適當(dāng)?shù)呐懦ㄈふ以蚩梢杂行У募涌炫挪榈乃俣取?/p>

　　若在進(jìn)樣空氣針中發(fā)現(xiàn)了化合物峰，則可判斷污染來自儀器管路與樣品無關(guān)，需要對管路接口，離子源，進(jìn)樣針，色譜柱等部件進(jìn)行排查修復(fù)。

　　如果起始的基質(zhì)空白和高濃度樣品后的空白都出現(xiàn)化合物峰，則污染來自于基質(zhì)或樣品制備中，對實(shí)驗(yàn)前處理中使用的移液器，試劑耗材，人員操作或?qū)Ω鼡Q不同批次的空白基質(zhì)進(jìn)行排查。

　　如果化合物峰出現(xiàn)在試劑或者溶劑中，則污染可能來自實(shí)驗(yàn)使用的溶劑，更換同品牌不同批次或不同廠商的實(shí)驗(yàn)試劑排查。